注意事項(xiàng)：
     盡管經(jīng)測(cè)試Annexin V-FITC反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個(gè)月內(nèi)推薦4℃保存，并適當(dāng)注意避免反復(fù)凍融。
     如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。
     染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。
     如果細(xì)胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設(shè)法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì)消化并降解Annexin V-FITC，導(dǎo)致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨(dú)染色時(shí)出現(xiàn)了過(guò)多的PI假陽(yáng)性細(xì)胞，并且通過(guò)調(diào)整相關(guān)設(shè)置和參數(shù)也無(wú)法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進(jìn)行檢測(cè)，這樣通?？梢杂行p少假陽(yáng)性的壞死細(xì)胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱：小鼠小腸上皮細(xì)胞系
英文簡(jiǎn)稱：MODE-K 細(xì)胞

貨號(hào)：LZ-X969678
規(guī)格：T25
生長(zhǎng)特性：貼壁

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價(jià)，產(chǎn)品貨期短，價(jià)格優(yōu)，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實(shí)驗(yàn)材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺(tái)；

花生四烯酸阿米卡星藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） AK 30ug TNF ALPHA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

華蟾它靈頭孢西丁藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） FOX 30ug TNF BETA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

華蟾酥基頭孢呋新鈉藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CXM 30ug TNF BETA蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

槐定堿 苯唑西林藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） OX 1ug TNF BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

槐果堿阿莫西林 AmL 10ug TRAIL 蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

槐角苷頭孢噻肟藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CTX 30ug TRAIL 蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

還原型谷胱甘肽磷霉素 FOS 50ug TRAIL 蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

環(huán)巴哌拉西林藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） PRL 100ug TSH-BETA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

環(huán)黃芪利福平 RD 5ug TSH-BETA蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

環(huán)氧前胡阿莫西林-棒酸（澳格門?。?AMC 30ug TSH-BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

環(huán)氧續(xù)隨子頭孢哌酮藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CFP 75ug TUBULIN蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

環(huán)氧澤瀉烯氨曲南藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） ATM 30ug TUBULIN蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒

黃柏堿頭孢他啶藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CAZ 30ug TUBULIN蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒

黃柏酮頭孢曲松藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CRO 30ug VEGF蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

黃豆黃苷環(huán)沙星藥敏實(shí)驗(yàn)紙片（擴(kuò)散法） CIP 5ug VEGF蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒
MODE-K 細(xì)胞乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗原(R型)人參皂苷Rh2Human

磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原(S型)人參皂苷Rg3(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗原(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

磷化Smad2抗原(S型)原人參三Human, Mouse, Rat

Smad4抗原(±)-柚皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

Smad 7(多肽)1,2,3,4,6-O-沒(méi)食子酰葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

磷化SMAD(p-Ser425)抗原1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g...Human

突觸相關(guān)膜蛋白25抗原1,3-二咖啡酰奎寧(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

Snail蛋白抗原1,7-雙苯-5-羥-6-庚烯-3-Human