單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測(cè)試盒操作步驟：

1、貼壁細(xì)胞的消化

①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變

化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。

⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000～2000g 離心 min，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

GH3, 大鼠垂體生長(zhǎng)激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞

QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

SGC-7901, 人胃腺癌細(xì)胞系

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞

A549, 人肺癌細(xì)胞系

SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞

WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株

U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞

WM451, 人黑色素瘤細(xì)胞

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細(xì)胞

C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌

Hela, 人宮頸癌細(xì)胞系

HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞

HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系

Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞