鮑氏不動桿菌（Acinetobacter baumannii）是一種重要的多重耐藥革蘭陰性條件致病菌，常引起醫(yī)院獲得性肺炎、血流感染及傷口感染，嚴重威脅重癥患者生命安全。為實現快速、精準檢測，基于熒光定量pcr（qpcr）技術的熒光pcr檢測試劑盒已被廣泛應用于臨床微生物實驗室。值得注意的是，盡管pcr本身不依賴傳統(tǒng)培養(yǎng)，但在試劑盒開發(fā)、性能驗證及陽性對照制備等環(huán)節(jié)，仍需依賴特定培養(yǎng)基對鮑氏不動桿菌進行擴增培養(yǎng)。本文將聚焦于該過程中所用培養(yǎng)基的關鍵組分及其典型含量，解析其在保障檢測準確性中的作用。

　　一、基礎營養(yǎng)成分

　　常用的培養(yǎng)基為Mueller-Hinton Broth（MHB）或Luria-Bertani（LB）液體培養(yǎng)基。以LB為例，其標準配方通常包含：胰蛋白胨（Tryptone）10 g/L、酵母提取物（Yeast Extract）5 g/L、氯化鈉（NaCl）10 g/L，pH調至7.0–7.2。胰蛋白胨提供氨基酸與多肽，酵母提取物富含維生素與核苷酸，共同滿足鮑氏不動桿菌快速生長的代謝需求。高純度原料可避免抑制pcr反應的雜質（如多糖、酚類）混入后續(xù)DNA提取流程。

　　二、選擇性添加劑

　　在復雜樣本（如痰液、傷口拭子）中，為抑制雜菌生長、富集鮑氏不動桿菌，可在基礎培養(yǎng)基中添加選擇性抑制劑。如加入Ceftazidime（32 mg/L）或Imipenem（2–4 mg/L）可抑制多數腸桿菌科細菌，而鮑氏不動桿菌因天然耐藥性得以增殖。此外，部分研究采用含Vancomycin（30 mg/L）的培養(yǎng)基，以抑制革蘭陽性菌干擾。需注意：抗生素濃度過高可能抑制目標菌，過低則選擇性不足，需經預實驗優(yōu)化。

　　三、緩沖與滲透壓調節(jié)劑

　　維持穩(wěn)定的pH和滲透壓對細菌活性至關重要。除NaCl外，部分改良培養(yǎng)基添加磷酸鹽緩沖體系（如K?HPO?2.3 g/L、KH?PO?1.5 g/L），使pH在培養(yǎng)過程中保持在6.8–7.4之間，避免代謝產酸導致環(huán)境惡化。此外，Mg²?和Ca²?（通常以MgSO?·7H?O 0.12 g/L、CaCl?0.011 g/L形式加入）雖非LB常規(guī)成分，但在某些高密度培養(yǎng)方案中用于穩(wěn)定細胞膜結構，提升DNA得率。

　　四、與pcr兼容性的考量

　　用于制備陽性模板的培養(yǎng)基必須確保后續(xù)核酸提取的高效性。因此，應避免使用含高濃度瓊脂、染料（如結晶紫）或螯合劑（如EDTA）的成分，以免干擾裂解或抑制Taq酶活性。理想情況下，培養(yǎng)16–18小時后，菌液OD???達0.6–0.8，此時菌體處于對數生長期，DNA完整性高，可作為標準陽性對照。

　　鮑氏不動桿菌熒光pcr檢測試劑盒配套培養(yǎng)基雖不直接參與擴增反應，但其組分設計直接影響陽性對照質量與檢測可靠性。通過科學配比營養(yǎng)、選擇性抑制與緩沖體系，在保障目標菌高效增殖的同時，最大限度減少pcr抑制物引入，是實現“快、準、穩(wěn)”分子診斷的重要前提。未來，隨著無培養(yǎng)直接檢測技術的發(fā)展，此類培養(yǎng)基的應用或將逐步減少，但在當前質量控制體系中仍十分重要。